การตรวจวินิจฉัยแอลฟาธาลัสซีเมียด้วยเทคนิค 4-deletion multiplex PCR

Diagnosis of alpha thalassemia using 4-deletion multiplex PCR

Abstract

แอลฟาธาลัสซีเมียเป็นโรคทางพันธุกรรมที่พบมากในประเทศไทย ชนิดที่มีความรุนแรง คือ แอลฟาธาลัสซีเมีย 1 ซึ่งเกิดการขาดหายไปของยีนแอลฟาโกลบินชนิด Southeast Asian (SEA) และ Thai deletion นอกจากนี้ยังมีแอลฟาธาลัสซีเมีย 2 ซึ่งความรุนแรงของโรคไม่มากเท่าชนิดแรกเกิดจากการขาดหายไปของยีนแอลฟาโกลบินชนิด-3.7 kb และ -4.2 kb ซึ่งการตรวจวินิจฉัยโรคแอลฟาธาลัสซีเมียของโรงพยาบาลมหาวิทยาลัยนเรศวรด้วยเทคนิค gap PCR นั้นเป็นการตรวจเฉพาะแอลฟาธาลัสซีเมีย 1 ซึ่งเกิดจากการขาดหายไปของยีนชนิด SEA และ THAI deletion เท่านั้น หากผู้ที่มารับการตรวจมียีนของแอลฟาธาลัสซีเมียชนิดอื่นอาจนำไปสู่การตรวจวินิจฉัยที่ผิดพลาดได้ คณะผวูิ้จัยจึงไดพั้ฒนาเทคนคิ ที่สามารถตรวจหายีนแอลฟาธาลัสซีเมียชนิดทมีี่การขาดหายของยีนทงั้ 4 ชนิดในการตรวจเพียงครั้งเดียว (4-deletion multiplex PCR) ได้แก่ แอลฟาธาลัสซีเมีย 1 ( -thal 1) ชนิด SEA, THAI deletion แอฟาธาลัสซีเมีย ( -thal 2) ชนิด -3.7 kb และ -4.2 kb deletion ซึ่งครอบคลุมชนิดของการขาดหายไปของยีนแอลฟาโกลบินที่พบได้ในประชากรจังหวัดพิษณุโลก โดยได้นำมาตรวจวินิจฉัยผู้ที่มารับการตรวจโรคธาลัสซีเมียจำนวน 10 ราย พบว่า เทคนิค 4-deletion multiplex PCR ให้ผลการตรวจวินิจฉัยที่ถูกต้องเหมือนกบั การใชว้ ธิ กี ารตรวจวนิ จิ ฉยั โดยใชเ้ ทคนคิ แบบเดิม แตส่ ามารถลดคา่ ใชจ้ า่ ย และระยะเวลาในการตรวจหาชนดิ ของโรคแอลฟาธาลัสซีเมยี ชนิดที่มีการขาดหายของยีนได้ โดยคณะผู้วิจัยมีแผนที่จะนำเทคนิคดังกล่าวมาตรวจวินิจฉัยในประชากรพิษณุโลกในจำนวนอีก 100 ราย เพื่อประเมินและทดสอบประสิทธิภาพของเทคนิค รวมทั้งเก็บข้อมูลความชุกของชนิดแอลฟาธาลัสซีเมียในพื้นที่ดังกล่าว เพื่อใช้ในการวางแผนการควบคุมป้องกันโรคแอลฟาธาลัสซีเมียในจังหวัดพิษณุโลกต่อไป

-Thalassemia is the common genetic disease in Thailand. The cause of -thalassemia is the deletion of -globin gene.
Southeast Asian (SEA) and THAI deletion types caused the most severe -thalassemia 1and deletion sizes 3.7 kb and 4.2 kb caused
-thalassemia 2. For -thalassemia diagnosis at Naresuan University Hospital, gap PCR technique was used to detect only -
thalassemia 1, SEA and THAI deletion. This protocol did not cover -thalassemia 2 that might cause misdiagnosis. We developed
the technique to detect 4 -globin gene deletions ( -thalassemia 1: SEA, THAI types and -thalassemia 2: -3.7 kb, -4.2 kb)
found in Phitsaulok population so called 4-deletion multiplex PCR. We tested this technique in known 10 samples from Naresuan
University and found that it concordant to the conventional technique. This technique is accurate, efficient, less time-consuming and
save the cost in -thalassemia diagnosis. We planned to tested and evaluated deletions types in 100 Phitsanulok samples. Moreover,
these data could be valuable for prevention plan and control of -thalassemia disease in Phitsanulok province.